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01-252024

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苦參抗水產(chǎn)病原哈氏弧菌活性物質(zhì)的提取、鑒定及作用機(jī)制

郭斯崖1,2,3鄭慧芳1,2張淼1,2蔡靜1,2王鑫彤1,2,3郭雷1,2

1. 江蘇海洋大學(xué)江蘇省海洋生物產(chǎn)業(yè)技術(shù)協(xié)同創(chuàng)新中心,江蘇省海洋生物資源與環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 2. 江蘇海洋大學(xué)海洋食品與生物工程學(xué)院,江蘇省海洋生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 3. 江蘇海洋大學(xué)藥學(xué)院,江蘇省海洋藥物活性分子篩選重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

摘要：利用單因素實(shí)驗(yàn)、Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)合響應(yīng)面分析法，從提取溶劑（蒸餾水、50%甲醇、甲醇、50%乙醇、乙醇）、乙醇濃度（60%～100%）、提取溫度（60℃、70℃、80℃、90℃、100℃）、提取時間（60 min、90 min、120min、150 min、180 min）和液料比等對抑菌活性的影響幾方面優(yōu)化苦參抗水產(chǎn)病原哈氏弧菌（Vibrio harveyi）活性物質(zhì)（ASSF）的提取工藝；采用高效液相色譜和標(biāo)準(zhǔn)品比對技術(shù)，鑒定ASSF的抗菌活性化合物；從對哈氏弧菌的生長、細(xì)胞膜的完整性和通透性、細(xì)胞壁的通透性等方面探討ASSF的作用機(jī)理。結(jié)果表明：ASSF的最佳提取條件是：無水乙醇為溶劑，液料比30∶1 m L/g，提取溫度79℃，提取146 min。在此條件下，提取物抑菌圈的實(shí)際值為（17.64±0.22）mm，與預(yù)測值無顯著性差異。固態(tài)ASSF的得率為（21.17±0.91）%。鑒定出苦參酮是ASSF中的抗哈氏弧菌活性化合物。ASSF和苦參酮的最小抑菌濃度分別為0.125 mg/m L和0.062 5 mg/m L。ASSF對于哈維氏弧菌的抑制作用主要是通過破壞細(xì)胞膜的完整性和通透性、細(xì)胞壁的通透性抑制細(xì)胞的增殖。本研究結(jié)果可為進(jìn)一步開發(fā)苦參酮在水產(chǎn)病害防治中的應(yīng)用提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞：

苦參;哈氏弧菌;抗菌活性;提取工藝;苦參酮;

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