摘要:2020年5月,廣東廣州某野生動物保護基地爆發(fā)疑似病毒引發(fā)的疾病?,F(xiàn)場采樣發(fā)現(xiàn),病鯢體長約2 m,反應遲鈍,體表有出血點或潰瘍癥狀。本研究采用胖頭鯉肌肉細胞系(fat head minnow epithelial cells, FHM)培養(yǎng)、超薄切片透射電鏡觀察、病毒主要衣殼蛋白(major capsid protein, MCP)克隆與測序分析等方法,從患病大鯢中分離得到一株病毒,鑒定其屬于虹彩病毒科蛙病毒屬,命名為大鯢虹彩病毒廣州分離株(CGSIV-GZ)。FHM經患病大鯢組織勻漿液接種后出現(xiàn)細胞圓縮、死亡、脫落等典型的細胞病變癥狀。將感染后的FHM細胞制作超薄切片,通過電鏡觀察發(fā)現(xiàn),F(xiàn)HM細胞中存在大量直徑約100~120 nm具囊膜的正六邊形成熟病毒粒子,形態(tài)與虹彩病毒相似。根據(jù)虹彩病毒MCP基因保守區(qū)域序列設計特異性引物對病鯢組織樣本進行PCR擴增,獲得了431 bp的目的基因片段,測序后經采用BLAST軟件分析,發(fā)現(xiàn)其與GenBank中的蛙病毒衣殼蛋白基因同源性達96%~99%。確認本次野生動物保護基地大鯢發(fā)生大規(guī)模死亡是蛙病毒感染所致。