摘要:為查明湖北石首大垸農(nóng)場養(yǎng)殖的黑斑蛙(Rana nigromaculata)歪頭病病原與致病原理,本研究應(yīng)用微生物分離技術(shù),從病蛙腦、肝、脾和腎臟組織中分離、純化病菌,采用形態(tài)特征、生理生化鑒定、16S rRNA基因序列分析進(jìn)行細(xì)菌種類鑒定,通過組織病理學(xué)方法分析患病蛙病理損傷,及人工回歸感染確定其致病性,并利用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)。結(jié)果顯示:分離菌(BSH3)與米爾伊麗莎白菌(Elizabethkingia miricola)聚為一支,結(jié)合該菌的形態(tài)學(xué)特征和生理生化特征,綜合鑒定為米爾伊麗莎白菌。組織病理切片結(jié)果表明分離菌(BSH3)會(huì)導(dǎo)致蛙腦組織基質(zhì)水腫,基質(zhì)中出現(xiàn)空泡和炎性細(xì)胞浸潤的現(xiàn)象;肝、脾和腎臟組織出現(xiàn)變性、壞死和炎癥細(xì)胞浸潤。人工回歸感染試驗(yàn)顯示,菌株可使黑斑蛙出現(xiàn)與自然發(fā)病蛙相似癥狀,半數(shù)致死濃度為6.3×10~4 CFU/mL。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明菌株已呈現(xiàn)多重耐藥性,僅對少數(shù)檢測抗生素(米諾環(huán)素、氟苯尼考、利福平和萬古霉素)敏感,根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果及農(nóng)業(yè)部水產(chǎn)用藥規(guī)定,推薦使用氟苯尼考治療該疾病。