摘要:為查明上海市奉賢區(qū)某對蝦養(yǎng)殖場疑似患急性肝胰腺壞死病的凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)的病原菌,本研究從患病凡納濱對蝦肝胰腺組織分離純化到1株優(yōu)勢菌FHBX-1,并通過人工回歸感染試驗確定其致病性,利用VITEK-2全自動微生物鑒定儀和16S rRNA、熱休克蛋白HSP60基因序列分析進(jìn)行綜合鑒定,并檢測其毒力基因。同時采用K-B紙片擴(kuò)散法檢測病原菌的藥物敏感性并通過石蠟切片觀察患病凡納濱對蝦肝胰腺組織的病理特征。結(jié)果顯示:菌株FHBX-1經(jīng)生理生化特征測定、16S rRNA和熱休克蛋白HSP60基因序列分析,綜合鑒定為副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus),且攜帶了急性肝胰腺壞死病相關(guān)的毒力基因pirAVP、pirBVP,未攜帶副溶血弧菌臨床主要毒力基因耐熱直接溶血毒素tdh和相對耐熱直接溶血毒素trh基因。人工回歸感染試驗結(jié)果顯示,凡納濱對蝦在菌液濃度為1.0×10~6 CFU/mL浸泡感染試驗組,7 d內(nèi)累計死亡率為80%,患病凡納濱對蝦具有肝胰腺顏色變白、萎縮變小,胃腸變空等癥狀,從病蝦再次分離的優(yōu)勢細(xì)菌與原攻毒菌FHBX-1特性相同。組織病理學(xué)觀察顯示,患病凡納濱對蝦肝胰腺上皮細(xì)胞嚴(yán)重脫落,肝小管崩塌,呈典型的AHPND病理特征。藥敏試驗結(jié)果表明,菌株FHBX-1對氟苯尼考、多西環(huán)素、恩諾沙星等11種抗菌藥物敏感,對新霉素、紅霉素中度敏感,對鏈霉素、慶大霉素等5種抗菌藥物耐藥。本研究可為對蝦急性肝胰腺壞死病的流行病學(xué)研究及藥物防控提供基礎(chǔ)依據(jù)。