摘要：為篩選出適合制作水產(chǎn)微生態(tài)制劑的黃金鯽Carassius auratus魚源益生菌,從黃金鯽腸道分離細(xì)菌,通過產(chǎn)酶能力測(cè)試、體外抑菌試驗(yàn)和抗生素敏感性試驗(yàn)進(jìn)行篩選,篩選菌株經(jīng)純化培養(yǎng)后通過形態(tài)特征觀察、生理生化及分子特征進(jìn)行鑒定;采用紫外分光光度計(jì)和稀釋涂布平板計(jì)數(shù)相結(jié)合的方法,建立細(xì)菌活菌數(shù)與OD值的線性曲線,測(cè)定細(xì)菌對(duì)高溫、酸性、胃液、腸液、膽鹽耐受能力;通過固定黃金鯽體外腸道黏液蛋白模型,結(jié)合熒光標(biāo)記物Hoechst 3325標(biāo)記細(xì)菌法,檢測(cè)細(xì)菌對(duì)黃金鯽腸黏液蛋白的黏附能力,并通過急性毒性試驗(yàn)檢測(cè)菌株的安全性。結(jié)果表明:從黃金鯽腸道中共分離出5株具有產(chǎn)酶能力的細(xì)菌,其中HJJ-1菌株具備較好的產(chǎn)酶特性,可有效抑制金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的生長(zhǎng),且對(duì)多種藥物敏感;進(jìn)一步對(duì)該菌株進(jìn)行鑒定及益生效果評(píng)價(jià),16S rRNA基因序列分析顯示,HJJ-1株與蠟狀芽孢桿菌Bacillus cereus的一致性達(dá)100%,結(jié)合形態(tài)觀察和生理生化試驗(yàn)結(jié)果,最終鑒定HJJ-1菌株為蠟狀芽孢桿菌;菌株OD600 nm值（x）與活菌數(shù)（y）的回歸方程式為y=5.493 3e7.823 8x（R2=0.990 2）,該菌株具有良好的耐高溫、耐酸性、耐胃液、耐腸液、耐膽鹽等特點(diǎn),可黏附于黃金鯽腸道黏液蛋白,且安全性良好。研究表明,本試驗(yàn)中最終篩選出的黃金鯽魚源蠟狀芽孢桿菌性能優(yōu)良且安全,具有潛在的益生特性。
