四川地區(qū)養(yǎng)殖鯽鯉皰疹病毒Ⅱ型的鑒定及病理學(xué)研究
摘要：為探究疾病病因和流行特點(diǎn),對(duì)患病鯽進(jìn)行剖檢、病理學(xué)觀察、分子生物學(xué)檢測(cè)及人工感染實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示,患病鯽臨床表現(xiàn)為離群獨(dú)游、浮頭、全身發(fā)黑及體表出血等。剖檢發(fā)現(xiàn)鰓、肝臟、腎臟等器官出血、腫脹和壞死,鰾點(diǎn)狀出血。組織病理觀察顯示,鰓呼吸上皮細(xì)胞腫脹、壞死及脫落;腎臟局灶性壞死;脾臟組織廣泛變性壞死,造血系統(tǒng)崩解;肝臟發(fā)生空泡變性和壞死。透射電鏡觀察到脾臟和腎臟中存在4種大小不同的病毒顆粒,分別為DNA病毒內(nèi)核、空衣殼、實(shí)心衣殼和有包膜的成熟病毒粒子。未成熟的病毒粒子存在于細(xì)胞核,成熟的病毒粒子存在于細(xì)胞質(zhì)。電鏡下可見(jiàn)鯉皰疹病毒Ⅱ型（CyHV-2）在細(xì)胞核內(nèi)完成核酸復(fù)制和核衣殼裝配,囊膜蛋白在出核后獲得。細(xì)胞核萎縮、核染色質(zhì)邊緣化,線(xiàn)粒體腫脹、壞死、嵴斷裂,細(xì)胞質(zhì)空泡化。取患病鯽組織勻漿濾菌后接種到鯉上皮瘤細(xì)胞系（epithelioma papulosum cyprinid cell line,EPC）和胖頭鯉肌肉細(xì)胞系（fathead minnow cell line, FHM）,盲傳3代后未見(jiàn)細(xì)胞病變。通過(guò)腹腔注射患病鯽組織勻漿進(jìn)行人工感染實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)組鯽表現(xiàn)出與自然感染鯽相同的臨床癥狀，對(duì)照組鯽正常,實(shí)驗(yàn)組累積死亡率為80%。用PCR方法檢測(cè)CyHV-2的解旋酶基因片段,擴(kuò)增出預(yù)期大小相符的目的條帶。利用鄰近法對(duì)該病毒的解旋酶基因進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析,結(jié)果顯示與CyHV-2（YZ-01）的同源性為99%。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了CyHV-2是導(dǎo)致這次疾病暴發(fā)的原因。
